产品介绍
产品介绍
Cancer Stem cells Spheres Medium（肿瘤干细胞成球培养基）是一款用于将癌症干细胞（CSC）培养成3D球的培养基。癌症干细胞（CSC）被定义为肿瘤内的一小部分细胞，具有自我更新的能力，并且经常在化学疗法治疗后驱动肿瘤的进展和复发。因此，针对CSC的特定疗法的开发有望改善癌症患者的生存和生活质量，特别是对于患有转移性疾病的患者。
肿瘤干细胞成球培养基是一种新的化学成分确定和无血清的癌症干细胞培养基，可支持CSC形成3D球状细胞的聚集和扩增。
产品信息
产品名称
肿瘤干细胞成球培养基
货号
OG-CSS-100
规格
20ml
数量
5瓶
储存及效期
-20℃，12个月，避免反复冻融
操作说明
细胞球构建
1、 将癌细胞系使用T25培养瓶培养至80%-90%，保证状态良好；
2、 吸弃癌细胞培养基，使用1ml含胰蛋白酶的EDTA将贴壁癌细胞系消化成单细胞悬液，将悬液吸至15ml离心管；
3、 加入3ml PBS，80-100g离心5min，并吸弃上清，加入1ml 肿瘤干细胞成球培养基重悬；
4、 进行细胞计数，并用肿瘤干细胞成球培养基将细胞悬液稀释至1X106个细胞/ml；
5、 将细胞接种以1X104个细胞/ml的浓度接种于超低吸附板中；
6、 根据使用的细胞类型，孵育培养物 4-10 天。每 3-4 天半换一次新鲜肿瘤干细胞成球培养基。不要像传统二维细胞培养一样一次性更换所有培养基；
7、 4-10 天左右在超低吸附板孔中央区域会形成肿瘤球体；
细胞球传代
8、 根据所使用的细胞类型不同传代时间也会有差异，一般是在癌细胞球培养的4-10天后；
9、 用巴氏吸管将细胞球悬液移至15ml离心管中；
10、让癌细胞球在重力效果下沉降10分钟。吸出上清液，注意不要吸出癌细胞球体；
11、加入PBS，重复步骤10，轻轻吸出上清；
12、加入1ml含胰蛋白酶的EDTA，室温消化2-4分钟，每30秒可轻微晃动离心管，避免癌细胞球下沉；
注：不同癌细胞球消化时长有所不同，需根据经验判断消化时长。
13、用移液枪轻微吹打癌细胞球，使其生成单细胞悬液，肉眼检查，确认无大细胞聚集体残留即可，后加入2ml胰酶抑制剂，终止消化；
14、80-100g离心5min，吸弃上清，加入1ml 肿瘤干细胞成球培养基重悬；
15、进行细胞计数，并用肿瘤干细胞成球培养基将细胞悬液稀释至1X106个细胞/ml；
16、重新以1X104个细胞/ml的浓度接种于新的超低吸附板中即可。
